近日，吉林农业大学食品科学与工程学院质量与安全教研室研究人员发表论文，旨在从新阿波罗栖热袍菌Thermotoga neapolitana（DSM 4359）中克隆葡萄糖苷酶基因，并将其转化进大肠杆菌中进行体外表达，研究重组酶的酶学性质。研究指出，Thermotoga neapolitana（DSM 4359）中葡萄糖苷酶基因成功克隆并表达于大肠杆菌中。葡萄糖苷酶能特异性水解α-（1→1）糖苷键。该文发表在2013年第06期《吉林大学学报(医学版)》杂志上。
以Thermotoga neapolitana基因组DNA为模板，根据该基因序列设计引物，采用PCR法扩增出葡萄糖苷酶基因，将其连接到pET-28a（+）载体上，转化入E.coli BL21（DE3）宿主菌中。经IPTG诱导体外高效表达。研究重组酶的最适反应温度、pH值和底物特异性。
PCR扩增得到825bp的片段，编码274个氨基酸，并连接到载体pET-28a（+）上，成功转化到宿主菌中，并在体外进行了高效表达。丙烯酰胺凝胶电泳，目标蛋白相对分子质量约为63 000。重组酶的最适反应温度为75℃，在70℃～85℃范围内仍保持60%以上活力。最适反应pH值为5.0，在pH 3.0～6.0范围内仍能保持70%以上活力。最适底物为海藻糖，其次为龙胆二糖，其他糖苷键连接的二糖的活力均很低或没有活力。
