研讨会从饲料酶制剂上下游产品、技术的开发与应用,常规典型酶制剂应用技术精细化、新型酶类创新开发与应用,不同动物酶制剂应用技术差异化等多角度研讨了饲料酶制剂科技发展现状与趋势;并从产业现状的优势与弊端探讨了产业发展问题与趋势。研讨会期间,代表们研讨积极、交流热烈,创造了良好的学术研讨氛围。
本次大会内容聚焦、特色鲜明、交流深刻,成果丰硕。大会的召开,给场内、场外学术与技术精英提供了一个交流学习的良好平台,大大促进我国饲料酶制剂领域理论创新研究、新产品与技术创新开发工作的开展。
大会得到了院士、学者、行业精英,19家企业的大力支持。参与单位精心组织,做了大量辛勤劳动,有力保障了会议取得圆满成功。
▲图:闭幕式现场(从右至左)
姚 斌丨中国农业科学院饲料研究所研究员
冯定远丨华南农业大学动物科学学院教授
孔平涛丨北京博亚和讯农牧技术有限公司总经理
罗会颖丨中国农业科学院饲料研究所研究员
11月9日会议精彩分享
11月9日上午主持人:青岛蔚蓝生物股份有限公司饲料生物产品部徐雪梅总经理
11月9日上午主持人:河北农业大学动物科技学院副院长 陈宝江教授
图:林章凛 丨 长江学者,华南理工大学生物科学与工程学院教授、院长
《酶的分子工程》
林教授和大家分享了酶的分子工程的发展方向,据介绍,酶的稳定性是可叠加的,而活性是不可叠加的,因此,从饲料酶制剂的热稳定性切入研究是一个比较可靠的方向。另外,如果将酶制剂分子工程与高通量测序等技术结合起来或许可以找到酶制剂一些新的作用位点。
林教授还从技术角度分析了细胞色素P450酶的应用进展和蛋白工程,对企业有很大的启发。
其中,过氧化氢在畜禽中的应用趋势主要有:1)以肉鸡为实验动物,研究肉鸡机体抗氧化作用,检测肉鸡的血液、肝脏、脾脏中CAT的含量;2)以猪为实验动物,研究猪机体的氧化应激反应及影响,关于肠道粘膜氧化还原反应的状态研究居多;3)以鱼为实验动物,研究鱼体的抗氧化能力,检测鱼鳃 肝脏 肾脏中CAT的含量。
图:陈宝江丨 河北农业大学动物科技学院教授、副院长
《过氧化氢酶的作用机制研究及应用探讨》
据陈教授介绍,酶促防御系统主要有超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等,这些酶的抗氧化作用主要通过三种方式:消除自由基和活性氧,以免引发脂质过氧化;分解过氧化物,阻断过氧化链;除去起催化作用的金属离子。
其中,过氧化氢在畜禽中的应用趋势主要有:1)以肉鸡为实验动物,研究肉鸡机体抗氧化作用,检测肉鸡的血液、肝脏、脾脏中CAT的含量;2)以猪为实验动物,研究猪机体的氧化应激反应及影响,关于肠道粘膜氧化还原反应的状态研究居多;3)以鱼为实验动物,研究鱼体的抗氧化能力,检测鱼鳃 肝脏 肾脏中CAT的含量。
陈教授指出,目前过氧化氢酶的使用并没有被纳入标准中,未来还需加强对过氧化氢酶的酶活稳定性、应用效果稳定性等的深入研究。
图: 李新良丨 湖南尤特尔生化有限公司董事长/总裁
《玉米阿拉伯木聚糖的高效降解酶》
李博士讲到谷物细胞壁结构复杂,不降解会影响各种养分的消化吸收,通过添加多种酶才能提高降解效率。其中,玉米阿拉伯木聚糖结构中支链化程度高,非常难易降解,需要与第五家族木聚糖降酶和阿拉伯呋喃糖苷酶的参与才能高效降解,传统的第十一家族木聚糖酶对其不起作用。
另外,谷物中两种木聚糖酶抑制蛋白XIP 、TAXI,他们是植物的保护机制,饲料用酶需要考虑这一因素。
图:王俊峰丨江苏奕农生物股份有限公司技术总监
《葡萄糖氧化酶——优化动物生长和代抗新选择》
王俊峰先生提到,葡萄糖氧化酶具有菌属特异性和高度底物专一性,在保护肠道方面同时具备多项生理功效,如保护肠道上皮细胞完整性;改善肠道酸性消化环境;控制肠道病菌生长繁殖等。经试验表明,在肉鸡料中添加葡萄糖氧化酶可达到50g效美素,或金霉素40ppm+恩拉霉素6ppm等抗生素促生长效果,并能有效提高日增重,改善料重比;在乳猪料和育肥猪中添加赐美康,可提高采食量,改善日增重。
图:李阳源丨溢多利集团研究院副院长,生物工业研究中心副主任 兼生物工业研究中心基因发酵工程研究部经理
《分子生物学技术在饲用酶制剂的应用 》
李阳源博士介绍了饲料酶制剂的前沿分子生物学技术:1)根据饲用酶制剂特性,基因筛选技术定向进行基因筛选2)酶分子改造技术提升饲用酶制剂的热稳定性、比活力等特性3)利用高效表达技术实现提高饲用酶制剂的表达活性,降低其生产成本。其中,饲用酶制剂分子改造方法有:非理性设计,该方法需要酶蛋白的晶体信息,构建较大的突变体文库,经过高效的高通量筛选;理性设计:分子模拟(同源建模、分子对接等),该方法需要酶蛋白的晶体信息,结果可预期,实验周期短;半理性设计:结合非理性和理性设计。此外,李博士还重点介绍了饲用酶制剂在毕赤酵母的高效表达。
图: 计 成 丨中国农业大学动物科技学院教授
《 饲料霉菌毒素生物降解技术 》
据计成教授介绍,2016年我国养殖业因霉菌毒素造成的损失超过160亿元,霉菌毒素传统的物理、化学和吸附解读法存在效果不稳定,降低饲料营养价值等问题。相比之下,生物降解法存在特异性强;降解率高;不影响饲料营养价值等优势。
计成教授课题组团队经研究分离得到的高活性枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素的降解率高达80%;并成功将科研成果转化为产品,即应用枯草芽孢杆菌ANSB060和降解玉米赤霉烯酮的菌ANSB01G经过15吨发酵生产霉菌毒素生物降解剂。
计成教授指出未来霉菌毒素的发展方向是通过生物技术及基因工程的手段,将降解酶基因克隆并转化到合适的载体中进行高效表达,以提高霉菌毒素降解酶产量,开发出高纯度、高活性的新型解毒酶。
图: 何 军 丨 四川农业大学动物营养研究所研究员
《 饲用角蛋白酶的开发及其应用 》
何军博士讲到,角蛋白酶是一种兼有二硫键还原酶和多肽水解酶活性的蛋白酶,可水解广泛存在于羽毛等副产物中的角蛋白成份,在多个行业特别是饲料工业上具有较大的应用前景,但因天然菌株产酶水平较低,限制了其应用。
为了获得高效表达的角蛋白酶基因工程菌株,本研究从地衣芽孢杆菌中克隆了其主要角蛋白酶基因(kerA),构建了kerA毕赤酵母表达载体,并成功实现了高水平异源表达;在此基础上,为改善重组酶稳定性,通过分析角蛋白酶基因和蛋白结构,利用定点突变技术在酶蛋白表面引入二硫键,显著改善了重组酶热稳定性;系统研究了重组角蛋白酶酶学性质;羽毛粉体外酶解试验表明,该酶对羽毛粉的水解效果优于胃蛋白酶和胰蛋白酶,但该重组酶与胃胰蛋白酶协同作用效果最好;此外,在含羽毛粉(5%)的玉米-豆粕型猪饲粮中添加该角蛋白酶可显著改善饲料中氨基酸及其他养分的利用率,改善猪只肠道微生物菌群结构。上述研究结果为推动角蛋白酶在饲料工业中的应用积累了资料。
图: 张广民 丨北京挑战生物技术有限公司总经理
《 饲用植酸酶的评估方法与高效应用 》
据张广民总经理介绍,植酸酶是性价比最佳的饲料添加剂,但并没有非常精准的使用方案,如超浓度添加植酸酶500-2000FTU/kg日粮时,对于表观回肠末端消化率(AID)为 86%-95%的氨基酸,植酸酶仅可提高其AID2%。
目前的植酸酶检测方法(GB/T 18634-2009)最适用于产品品控,对于植酸酶的有效性评估,最好参考磷的消化率指标。在配方中,精准化使用植酸酶需要综合考虑饲粮的组成、原料中磷浓度的变异、添加植酸酶后磷需要的情况等。
未来植酸酶的使用很有可能颠覆现有的配方体系,其营养价值精细化、高效植酸酶的开发或将成为行业发展的热点。
11月9日下午主持人才凤峰 :礼来(上海)动物保健有限公司饲料家禽业务全国销售总监
11月9日下午主持人 周 樱 :武汉新华扬生物股份有限公司副总经理
图:冯定远 丨华南农业大学动物科学学院教授
《从提高消化到降低代谢——饲料酶制剂营养功能认识的跨越》
冯教授介绍,饲料酶制剂的营养功能主要含消化功能和代谢功能。其中消化功能主要是提高饲料的营养消化;相反,代谢功能是降低营养代谢,这与某些抗营养因子造成的免疫反应、免疫消耗有关。
从免疫反应角度来看,抗原蛋白、部分多聚糖等抗营养因子是造成动物免疫反应的主要因素,多聚糖抗营养因子主要以水溶性β—半乳甘露聚糖为主。添加β—甘露聚糖酶可以减少β—甘露聚糖造成的持久而高烈度的免疫反应,减少能量消耗。
图: 陈清华丨湖南农业大学动物科技学院教授
《 饲用酶制剂高效应用技术研究 》
陈清华博士从饲料原料的角度分析了原料中不同的营养成分以及抗营养因子对畜禽生产性能的影响。陈博士讲到,不同饲用酶制剂产品之间质量差异较大,这主要受酶活性、添加量、酶谱、酶的有效性和针对性等因素影响。
酶的作用机制比较复杂,试验表明,不同酶制剂的高效组合可显著提高畜禽的生产性能,如将酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶进行组合后对肉鸡养分表观代谢率有显著的提高。具体实践中最好结合体外模拟实验和动物饲养试验对酶制剂的作用效果进行全面评估,以选出最佳方案。
图: 张会图丨天津科技大学生物工程学院副教授
《基因组学技术在构建蛋白酶高产工程菌株中的应用》
张会图教授分享了最新的基因组学技术,报告中主要从以下几个方面做介绍:1)优良酶基因的系统挖掘及筛选,对于难以培养微生物以及环境中的基因均可通过高通量测序及序列分析获得所需要的基因;2)表达调控元件的系统筛选与挖掘,包括组成型/诱导型启动子、信号肽、前导肽以及转录终止子的挖掘;3)系统了解宿主菌(或产酶菌株)在不同发酵阶段的基因表达特征,从整体角度出发,对产酶菌株进行遗传改造。张教授的分享为发酵工艺的优化提供了理论指导。
图: 谭会泽丨 广东温氏食品集团养禽事业部副总经理
《 禽用酶制剂应用技术理念与实践 》
谭会泽副总经理和大家分享了温氏集团酶制剂在家禽饲料中的实验研究成果。该实验项目对不同厂家的不同酶制剂产品进行试验评估。
试验结果发现:1)从复合酶配方看,以木聚糖酶、纤维素酶、 β-葡聚糖酶为主的复合酶产品效果稳定性比较高;2)豆粕日粮中添加甘露聚糖酶有一定的效果,但市场上的产品酶活变异大;3) 高剂量植酸酶在促进畜禽体重、提高饲料转化效率方面具有积极的作用;4)淀粉酶试验结果显示,其对改善料肉比效果不明显;5)葡萄糖氧化酶试验结果显示,对改善增重和料比均有较好的效果,其在未来替抗方面是不错的选择。
图: 何四旺 丨广州远旺饲料科技有限公司总经理
《 教槽料效果的评价方法及乳仔猪酶的应用 》
何四旺总经理首先介绍了教槽料的评价方法。目前酶制剂在仔猪料中的渗透率非常高,这主要因为仔猪断奶后由母乳转变为低乳糖、高淀粉和高抗原物质的固体饲料,其分泌的消化酶还不能满足食物成分变化的需要。乳仔猪酶评估试验结果显示:乳仔猪料中添加酶制剂后,仔猪的整齐度和消化性有所改善。
图: 赵丽芳丨北京昕大洋科技发展有限公司研发中心主任
《 饲用酶制剂的评价与选择 》
据赵博士介绍,饲料安全、成本和环保因素是目前影响饲料和养殖业可持续发展的主要因素,而饲用酶制剂是目前唯一能够在不同程度同时解决这三大问题的饲料添加剂。酶制剂本身活性不稳定,因此,对产品耐温性评价就显得尤为重要,行业内常用的有干热法、湿热法、水浴法和实际制粒法等,三种方法各有千秋。
赵博士通过体外消化试验、代谢试验和动物生产性能试验等从不同的角度分析了酶制剂在不同作用环境中的有效性,其中动物生产性能试验是评价酶制剂最直接、最具说服力的方法。
图: 姚 斌丨中国农业科学院饲料研究所研究员
《 饲料用酶研发的进展与趋势 》
目前酶制剂企业如何挖掘到具有应用价值的新酶?如何获得性能优良的好酶?针对这些酶制剂产业面临的挑战,姚斌研究员对酶结构功能、酶分子改良等多方面和大家进行了分享。姚研究员在酶蛋白方面提出了辅助催化位点(模块)的新观点;通过酶末端保护,提高酶的稳定性的新思路。
另外,姚研究员还分享了酶分子改良技术、酶制剂热稳定性等方面的最新研究进展。相信对酶制剂企业的研发具有很大的启发作用。
互动论坛
▲ 主持人:黄燕华 广东省农科院动物科学研究所研究员
▲图:互动嘉宾(从左至右)
徐雪梅丨青岛蔚蓝生物股份有限公司饲料生物产品部总经理
周 樱丨武汉新华扬生物股份有限公司副总经理
何四旺丨广州远旺饲料科技有限公司总经理
计 成丨中国农业大学动物科技学院教授
冯定远丨华南农业大学动物科学学院教授
陈清华丨湖南农业大学动物科技学院教授
张广民丨北京挑战生物技术有限公司总经理
▲图:现场互动