韩国江陵-原州(Gangneung-Wonju)国立大学环境和应用化学工程学院的研究人员于2010年12月中旬宣布,正在开发两步酶法路线以生物柴油燃料,该过程可减少生产成本。该过程采用产生脂肪酶的细菌,并继而再使用商业化酶。这种组合过程具有可减少使用商业化酶的双重优点,因而可降低成本,并可减少因甲醇而使酶的减活效应,甲醇使酶减活这一问题阻碍了酶法生物柴油燃料生产的商业化。
该大学研究团队选用产生脂肪酶的细菌Serratia marcescens,这种能产生脂肪酶的细菌从被润滑脂污染的壤中被隔离出来,并经化学变异提高其脂肪酶产生量。拥有最高脂肪酶活性的细菌经再次变异以进一步提高它们的脂肪酶活性。这些经二次变异的细菌细胞内脂肪酶活性比野生的类型要高出2.5倍。组合使用酶,采用甲醇作为酰基授体,就可使大豆油进行反酯化。虽然这种生物催化剂与商业上使用的酶相比,受甲醇影响的抑制性要小得多,但与商业上使用的酶相比生物柴油转化活性较小,因此需进一步改进。