酶的固定化方法很多,但对任何酶都适用的方法是没有的。酶的固定化方法通常按照用于结合的化学反应的类型进行分类(表7-5)。各种方法也各自具有自身的优缺点(表7-6)。
固定化方法 | 分 类 | 固定化方法 | 分 类 |
非共价结合法 | 结晶法 分散法 物理吸附法 离子结合法 | 化学结合法 | 交联法 共价结合法 |
包埋法 | 微囊法 网格法 |
表7-6 酶固定化方法的优缺点
特 性 | 物理吸附法 | 离子结合法 | 包埋法 | 共价结合法 | 交联法 |
制 备 | 易 | 易 | 易 | 难 | 难 |
结合力 | 中 | 弱 | 强 | 强 | 强 |
酶活力 | 高 | 高 | 高 | 中 | 中 |
底物专一性 | 无变化 | 无变化 | 无变化 | 有变化 | 有变化 |
再生 | 可能 | 可能 | 不可能 | 不可能 | 不可能 |
固定化费用 | 低 | 低 | 中 | 中 | 高 |
固定化酶可以用于两种基本的反应系统中:第一种是将固定化酶与底物溶液一起置于反应槽中搅拌,当反应结束后合固定化酶与产物分开;第二种是利用柱层析方法,将固定有酶蛋白的惰性载体装在柱中或类似装置中,当底物液流经时,酶即催化底物发生反应。