一目前测定葡萄糖氧化酶酶活的方法
1 电化学法
电化学法是根据酶促反应中的电压或电流变化发展起来的测量GOD 活性的方法。在GOD 研发初期，研究人员开发了基于电化学法原理的氧电极法、简易电化学法和自动电化学法，得到了较好的结果灵敏度和重复性。该方法需要通过测定反应体系的电位或电流变化才能实现GOD 活性测定，对操作人员和仪器的要求均很高。随着检测技术的发展，该方法已很少使用。
2测压法
测压法是基于GOD 的酶促反应中所消耗的氧量可测的原理建立的，可通过使用瓦勃氏仪测定耗氧量，每1 μg 酶在单位时间内所消耗的氧来确定GOD 的活性。该方法由于操作比较复杂，要求严格，且有很强的仪器依赖性（需要具备专用仪器———瓦勃氏仪），因此在应用中存在难度，未能被推广使用。
3滴定法
滴定法作为测定GOD 活性的主要方法，其基本原理是以过量的氢氧化钠溶液终止GOD 酶促反应并中和生成的葡萄糖酸，再以标准盐酸溶液反滴，计算得到生成的葡萄糖酸的量，从而推算出GOD 的活性。基于以上原理，测定时GOD 的酶活定义为：在pH 为5.6，温度为30℃的条件下，每分钟催化1 μmol 葡萄糖转化为葡萄糖酸和过氧化氢所需的酶量即为一个葡萄糖氧化酶酶活性单位（U）。此方法具有简便易行和检测成本较低的优势，适用于一般生产和研究，但同时也存在着工作量大、样品需要量大尤其是人工读数导致的测量精度低的缺点，不便于检测方法的标准化开发。
4分光光度法
随着检测技术研究的进展，参考其他酶制剂的检测方法，采用普通的分光光度法进行检测成为了建立GOD 活性检测方法的方向。其原理是通过供体与过氧化酶（POD）偶联的一个反应序列中进行的，即 GOD 在有氧条件下将葡萄糖氧化 δ-葡萄糖基-内酯和过氧化氢，生成的过氧化氢在有过氧化酶（POD）存在的条件下氧化供体，根据形成的氧化性供体特性，通过分光光度计在不同波长处进行检测。
二小结
对于上述4 种方法，前2 种方法（电化学法和测压法）由于其操作和仪器依赖方面存在的问题，未能被推广使用；后2 种方法（滴定法和分光光度法）则应用较多的，尤其是分光光度法，可以作为进一步进行检测方法标准化的主要选择对象。
本文来源：北京卫诺恩生物技术有限公司技术部 王合亮
