【英文篇名】 Purification and Characterization of 1,3-Propanediol Oxidoreductase from Klebsiella pneumoniae
【作者中文名】 陈宏文; 聂金峰; 方柏山;
【作者英文名】 CHEN Hong-wen; NIE Jin-feng; FANG Bai-shan（Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Fujian Province University; Huaqiao University; Quanzhou 362021; China）;
【作者单位】 华侨大学工业生物技术福建省高等学校重点实验室;
【文献出处】 华侨大学学报(自然科学版), Journal of Huaqiao University(Natural Science), 编辑部邮箱 2009年 01期
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【关键词】 1; 3-丙二醇氧化还原酶; 克雷伯杆菌; 甘油脱氢酶; 酶学性质; 纯化;
【英文关键词】 1; 3-propanediol oxidoreductase; Klebsiella pneumoniae; characterization; purification;
【摘要】 在有氧条件下,利用DEAE Sepharose Fast Flow弱阴离子离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析,同时分离并提纯克雷伯杆菌胞内的1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱氢酶.研究表明,1,3-丙二醇氧化还原酶的纯化倍数为35.86倍,回收率为5.17%,该酶最适表观反应温度为57℃,最适反应pH值为9.5.在30℃及pH=8.0~10.0时,该酶具有良好的稳定性.在45℃和pH=9.5条件下,该酶以1,3-丙二醇和NAD+为底物,其米氏常数Km分别为15.8,0.2 mmol.L-1.1,3-丙二醇氧化还原酶对生理反应底物3-羟基丙醛活性最大,对其他醇类也有氧化能力.Mn2+对酶有显著激活作用,巯基保护剂能明显提高酶的活力.
【英文摘要】 1,3-propanediol oxidoreductase from Klebsiella pneumoniae was purified by DEAE sepharose fast flow ion-exchange chromatography and Blue Sepharose CL-6B affinity chromatography under aerobic conditions.A 35.86-fold purification was obtained with the recovery of 5.17% activity.The optimum temperature and pH of the enzyme activity were 57 ℃ and 9.5 of pH value.At 30 ℃ and at range of pH 8.0～10.0,1,3-propanediol oxidoreductase was stable.At 45 ℃ and pH 9.5 the Km for 1,3-propanediol and NAD+ were 15.8 mmol·L-1 ...
【基金】 国家重点基础研究发展(973)计划项目(2007CB707804);; 国家高技术研究发展(863)计划项目(2006AA-020103);; 国家自然科学基金资助项目(20676048);; 福建省自然科学基金计划资助项目(E0510018)
【DOI】 CNKI:SUN:HQDB.0.2009-01-015
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